Gesamt IgE (Total IgE)

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Ref.: 36040000

Enzymimmunoassay zur quantitativen Bestimmung von Gesamt IgE in humanem Serum oder Plasma.

Die quantitative Bestimmung des zirkulierenden Gesamt IgE im Serum erfolgt durch einen nichtkompetitiven Enzymimmunoassay. Die Festphase besteht aus einer Mikrotiterkavität, an deren Innenfläche ein Anti-IgE adsorptiv gebunden ist. Im ersten Schritt werden Patientenserum bzw. -plasma und eine Verdünnungslösung in die Kavität pipettiert. Es erfolgt eine Bindung des Gesamt IgE an das festphasengebundene Anti-IgE. Ungebundenes Serum wird in einem Waschschritt entfernt. Im zweiten Schritt wird ein enzymmarkiertes Anti-human-IgE in die Kavität pipettiert. Es erfolgt eine Bindung des markierten Anti-human-IgE an das Gesamt IgE. Ungebundenes markiertes Anti-human-IgE wird in einem Waschschritt entfernt. Die Menge des gebundenen, markierten Anti-human-IgE ist  proportional zur Menge des Gesamt IgE im Serum/Plasma. Im nächsten Schritt wird eine Substratlösung (p-Nitrophenylphosphat) hinzugegeben. Durch die Aktivität der alkalischen Phosphatase entsteht eine gefärbte Lösung. Die Enzymreaktion wird am Ende der Inkubationszeit mit einer Stopplösung beendet. Die Extinktionen der gefärbten Lösungen werden im Photometer gemessen. Die Auswertung erfolgt über eine Kalibrierkurve, bestehend aus den Extinktionswerten der gemessenen Kalibrator-Kavitäten.

Gesamt IgE Kurzanleitung